Какие основные принципы работы секвенатора по Сенгеру?

Основные принципы работы секвенатора по Сэнгеру:

1. В пробирке проводят реакцию синтеза ДНК по уже существующей матрице (одноцепочечной генетической последовательности конкретного индивида), последовательность которой нужно установить. f-genetics.com Молекулу ДНК синтезирует фермент ДНК-полимераза, которая, в соответствии с матрицей, по одному встраивает нуклеотиды в растущую цепь. f-genetics.com
2. Среди всех нуклеотидов имеется 1% «терминирующих», каждый из которых также несёт особую флуоресцентную метку. f-genetics.com После встраивания таких нуклеотидов дальнейший синтез цепи становится невозможен. f-genetics.com
3. В результате образуется смесь уникальных фрагментов ДНК разной длины, которые начинаются одинаково, но заканчиваются в разных положениях вдоль цепи ДНК-матрицы. f-genetics.com Причём заканчиваются они одной из четырёх нуклеотидных меток. f-genetics.com
4. Затем происходит разделение этих фрагментов по величине с помощью капиллярного электрофореза. f-genetics.com Синтезированные фрагменты ДНК разделяются под действием электрического поля: чем меньше фрагмент, тем он быстрее движется в геле. f-genetics.com
5. Во время электрофореза луч лазера в определённом месте геля возбуждает флуоресценцию красителей, и детектор определяет, какой нуклеотид в настоящий момент мигрирует через гель. ib.komisc.ru Таким образом, регистрируя последовательность появления нуклеотидов, прибор складывает «буквы» (нуклеотиды) в «текст» (последовательность ДНК). ib.komisc.ru
6. Результаты анализируют с помощью компьютера и представляют в виде последовательности разноцветных пиков, соответствующих четырём нуклеотидам. ru.wikipedia.org